tibljТуберкулез и болезни легкихTuberculosis and Lung Diseases2075-12302542-1506Медицинские знания и технологии10.58838/2075-1230-2023-101-3-78-86tiblj-1734Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESНетозформирующая способность нейтрофилов у пациентов с ограниченным и распространенным туберкулезным процессомNETosis-Forming Ability of Neutrophils in Patients with Limited and Disseminated Tuberculous Lesionshttps://orcid.org/0000-0001-6196-7256МордыкА. В.MordykA. V.

Мордык Анна Владимировна, Д.м.н., профессор, заведующая кафедрой фтизиатрии, пульмонологии и инфекционных болезней

644099, г. Омск, ул. Ленина, д. 12

Тел.: +7 (913) 649-21-19 

Anna V. Mordyk, Doctor of Medical Sciences, Professor, Head of Department of Phthisiology, Pulmonology and Infectious Diseases

12, Lenina St., Omsk, 644099

Phone: +7 (913) 649-21-19 

amordik@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6775-323XЗолотовА. Н.ZolotovA. N.

Золотов Александр Николаевич, К.м.н., старший научный сотрудник 

644099, г. Омск, ул. Ленина, д. 12

Тел.: +7 (913) 977-77-96 

 

Aleksandr N. Zolotov, Candidate of Medical Sciences, Senior Researcher

12, Lenina St., Omsk, 644099

Phone: +7 (913) 977-77-96 

azolotov@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4339-2222НовиковД. Г.NovikovD. G.

Новиков Дмитрий Гергиевич, К.м.н., доцент, заведующий ЦНИЛ 

644099, г. Омск, ул. Ленина, д. 12

Тел.: +7 (906) 991-80-88  

Dmitry G. Novikov, Candidate of Medical Sciences, Associate Professor, Head of Central Research Laboratory 

12, Lenina St., Omsk, 644099

Phone: +7 (906) 991-80-88  

novikov.dm.omsk@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-8411-0973КириченкоН. А.KirichenkoN. A.

Кириченко Николай Александрович, Младший научный сотрудник  

644099, г. Омск, ул. Ленина, д. 12

Тел.: +7 (909) 536-96-68 

Nikolay A. Kirichenko, Junior Researcher 

12, Lenina St., Omsk, 644099

Phone: +7 (909) 536-96-68 

honomer_1608@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-6616-0152ПахтусоваП. О.PakhtusovaP. O.

Пахтусова Полина Олеговна, Младший научный сотрудник 

644099, г. Омск, ул. Ленина, д. 12

Тел.: +7 (923) 035-57-47 

Polina O. Pakhtusova, Junior Researcher

12, Lenina St., Omsk, 644099

Phone: +7 (923) 035-57-47 

ppahtusova@gmail.comПтухинА. О.PtukhinA.  O.

Птухин Александр Олегович, Очный аспирант 1-го года обучения, врач-фтизиатр 

644099, г. Омск, ул. Ленина, д. 12

644001, г. Омск, ул. 20 лет РККА, д. 15/1

Тел.: +7 (923) 038-08-91 

Aleksandr O. Ptukhin, Full Time Post-Graduate Student Phthisiologists  of Clinical TB Dispensary

12, Lenina St., Omsk, 644099

15/1, 20 Let RKKA St., Omsk, 644001

no. 4 Phone: +7 (923) 038-08-91

 

ФГБОУ ВО «Омский государственный медицинский университет» МЗ РФРоссияOmsk State Medical University, Russian Ministry of HealthRussian FederationФГБОУ ВО «Омский государственный медицинский университет» МЗ РФ; БУЗОО Клинический противотуберкулезный диспансер № 4РоссияOmsk State Medical University, Russian Ministry of Health; Clinical TB Dispensary no. 4Russian Federation202304072023101378–86Copyright © Мордык А.В., Золотов А.Н., Новиков Д.Г., Кириченко Н.А., Пахтусова П.О., Птухин А.О., 20232023Мордык А.В., Золотов А.Н., Новиков Д.Г., Кириченко Н.А., Пахтусова П.О., Птухин А.О.Mordyk A.V., Zolotov A.N., Novikov D.G., Kirichenko N.A., Pakhtusova P.O., Ptukhin A.O.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.tibl-journal.com/jour/article/view/1734Цель исследования

Цель исследования: оценить нетозобразующую способность нейтрофилов у пациентов с ограниченным и распространенным туберкулезным процессом.

Материалы и методы

Материалы и методы. В исследование включено 44 пациента с впервые выявленным туберкулезом органов дыхания. Группу 1 составили 22 пациента с ограниченным очаговым или инфильтративным туберкулезным процессом без распада легочной ткани, группу 2 – 22 пациента с распространенным туберкулезным процессом в фазе распада. Контрольную группу (группа 0) составили 22 здоровых добровольца. Определяли нетозобразующую способность in vitro в изолированной фракции нейтрофилов периферической венозной крови. Рассчитывали: соотношение (%) нейтрофилов разной степени активации и соотношение (%) различных форм нейтрофильных внеклеточных ловушек (НВЛ), коэффициент захвата бактерий НВЛ. Результаты. Нетозобразующая способность нейтрофилов у пациентов групп 1 и 2 была более выраженной в сравнении с группой 0, причем в группе 2 она была максимальной. Коэффициент захвата бактерий НВЛ в группе 2 был статистически значимо ниже, чем в группе 1 (p=0,0147), что может указывать на некоторую степень «неполноценности» НВЛ, формируемых в группе 2.

The objective

The objective: to assess NETosis-forming ability of neutrophils in patients with limited and disseminated tuberculous lesions.

Subjects and Methods

Subjects and Methods. 44 new cases of respiratory tuberculosis were included in the study. Group 1 consisted of 22 patients with limited focal or infiltrative tuberculosis with no lung tissue destruction, Group 2 included 22 patients with disseminated tuberculosis with destruction of the lung tissue. Control Group (Group 0) included 22 healthy volunteers. NETosis-forming ability was assessed in vitro in the isolated fraction of neutrophils from peripheral venous blood. The ratio (%) of neutrophils of different degrees of activation and the ratio (%) of various forms of neutrophil extracellular traps (NET), the bacterial capture coefficient of NEL were calculated.

Results

Results. NETosis-forming ability of neutrophils in the patients from Groups 1 and 2 was more pronounced versus Group 0, and in Group 2 it was maximum. In Group 2, the bacterial capture rate by NET was statistically significantly lower versus Group 1 (p=0,0147), which may indicate some degree of «inferiority» of NET formed in Group 2.

туберкулезнейтрофильные внеклеточные ловушки (НВЛ)нетозtuberculosisneutrophil extracellular traps (NETs) NETosisReferencesДолгушин И. И., Андреева Ю. С., Савочкина А. Ю. Нейтрофильные внеклеточные ловушки и методы оценки функционального статуса нейтрофилов. – М.: Издательство РАМН. 2009. – 208 с.Dolgushin I. I., Andreeva Yu. S., Savochkina A. Yu. Neytrofilnyye vnekletochnyye lovushki i metody otsenki funktsionalnogo statusa neytrofilov. [Neutrophil extracellular traps and methods for assessing the neutrophil functional state]. Moscow, Izdatelstvo RAMN Publ., 2009, 208 p.Долгушин И. И., Мезенцева Е. А., Савочкина А. Ю., Кузнецова Е. К. Нейтрофил как «многофункциональное устройство» иммунной системы // Инфекция и иммунитет. – 2019. – Т. 9, № 1. – С. 9–38. https://doi.org/10.15789/2220-7619-2019-1-9-38Dolgushin I. I., Mezentseva E. A., Savochkina A. Yu., Kuznetsova E. K. Neutrophil as a multifunctional relay in immune system. Infektsiya I Immunitet, 2019, vol. 9, no. 1, pp. 9-38. (In Russ.) https://doi.org/10.15789/2220-7619-2019-1-9-38Савочкина А. Ю., Пыхова Л. Р., Абрамовских О. С., Полторак А. Е., Четвернина Е. А. Сравнительный анализ показателей функциональной активности нейтрофилов периферической крови у больных с сепсисом в зависимости от исхода // Российский иммунологический журнал. – 2018. – Т. 12 (21). № 3. – С. 407–411. https://doi.org/10.31857/S102872210002419-5Savochkina A. Yu., Pykhova L. R., Abramovskikh O. S., Poltorak A. E., Chetvernina E. A. Comparative analysis of the indicators of the functional activity of neutrophils peripheral blood in patients with sepisis depending on the outcome. Rossiyskiy Immunologicheskiy Journal, 2018, vol. 12 (21), no. 3, pp. 407–411. (In Russ.) https://doi.org/10.31857/S102872210002419-5Способ обнаружения нейтрофильных внеклеточных ловушек в суправитально окрашенном препарате крови / Новиков Дмитрий Георгиевич (RU), Золотов Александр Николаевич (RU), Кириченко Николай Александрович (RU), Мордык Анна Владимировна (RU) // Патент на изобретение 2 768 152 C1, 23.03.2022. Заявка № 2021129097 от 06.10.2021.Sposob obnaruzheniya neytrofilnykh vnekletochnykh lovushek v supravitalno okrashennom preparate krovi. [Method for detection of neutrophil extracellular traps in supravital stained blood specimens]. Dmitry G. Novikov (RU), Alexander N. Zolotov (RU), Nikolay A. Kirichenko (RU), Anna V. Mordyk (RU). Patent no. 2 768 152 C1, 23.03.2022. Application no. 2021129097 dated 06.10.2021.Amaral E. P., Lasunskaia E. B., D’Império-Lima MR. Innate immunity in tuberculosis: how the sensing of mycobacteria and tissue damage modulates macrophage death // Microbes Infect. – 2016. – № 18. – Р. 11–20. https://doi.org/10.1016/j.micinf.2015.09.005Amaral E. P., Lasunskaia E. B., D’Império-Lima MR. Innate immunity in tuberculosis: how the sensing of mycobacteria and tissue damage modulates macrophage death // Microbes Infect. – 2016. – № 18. – Р. 11–20. https://doi.org/10.1016/j.micinf.2015.09.005Brinkmann V., Reichard U., Goosmann C., Fauler B., Uhlemann Y., Weiss D. S., Weinrauch Y., Zychlinsky A. // Neutrophil extracellular traps kill bacteria. Science. – 2004. – № 303. – Р. 1532–5. https://doi.org/10.1126/science.1092385Brinkmann V., Reichard U., Goosmann C., Fauler B., Uhlemann Y., Weiss D. S., Weinrauch Y., Zychlinsky A. // Neutrophil extracellular traps kill bacteria. Science. – 2004. – № 303. – Р. 1532–5. https://doi.org/10.1126/science.1092385Brinkmann V., Zychlinsky A. Beneficial suicide: why neutrophils die to make NETs // Nat. Rev. Microbiol. – 2007. – № 5. – Р. 577–82. https://doi.org/10.1038/nrmicro1710.Brinkmann V., Zychlinsky A. Beneficial suicide: why neutrophils die to make NETs // Nat. Rev. Microbiol. – 2007. – № 5. – Р. 577–82. https://doi.org/10.1038/nrmicro1710.de Melo M. G. M., Mesquita E. D. D., Oliveira M. M., Silva-Monteiro C., Silveira A. K. A., Malaquias T. S., Dutra T. C. P., Galliez R. M., Kritski A. L. and Silva E. C. Imbalance of NET and Alpha-1-Antitrypsin in Tuberculosis Patients Is Related With Hyper Inflammation and Severe Lung Tissue Damage // Front. Immunol. – 2019. – № 9. – Р. 3147. https://doi.org/10.3389/fimmu.2018.03147de Melo M. G. M., Mesquita E. D. D., Oliveira M. M., Silva-Monteiro C., Silveira A. K. A., Malaquias T. S., Dutra T. C. P., Galliez R. M., Kritski A. L. and Silva E. C. Imbalance of NET and Alpha-1-Antitrypsin in Tuberculosis Patients Is Related With Hyper Inflammation and Severe Lung Tissue Damage // Front. Immunol. – 2019. – № 9. – Р. 3147. https://doi.org/10.3389/fimmu.2018.03147Dorhoi A., Kaufmann S. H. Versatile myeloid cell subsets contribute to tuberculosis-associated inflammation // Eur. J. Immunol. – 2015. – № 45. – Р. 2191–202. https://doi.org/10.1002/eji.201545493Dorhoi A., Kaufmann S. H. Versatile myeloid cell subsets contribute to tuberculosis-associated inflammation // Eur. J. Immunol. – 2015. – № 45. – Р. 2191–202. https://doi.org/10.1002/eji.201545493Kaplan M. J., Radic M. Neutrophil extracellular traps: double-edged swords of innate immunity // J. Immunol. – 2012. – № 189. – Р. 2689–95. https://doi.org/10.4049/jimmunol.1201719Kaplan M. J., Radic M. Neutrophil extracellular traps: double-edged swords of innate immunity // J. Immunol. – 2012. – № 189. – Р. 2689–95. https://doi.org/10.4049/jimmunol.1201719Marakalala M. J., Raju R. M., Sharma K., Zhang Y. J., Eugenin E. A., Prideaux B., Daudelin I. B., Chen P. Y., Booty M. G., Kim J. H., Eum S. Y., Via L. E., Behar S. M., Barry CE 3rd, Mann M., Dartois V., Rubin E. J. Inflammatory signaling in human tuberculosis granulomas is spatially organized // Nat Med. – 2016; Vol. 22, № 5. – Р. 531–8. https://doi.org/10.1038/nm.4073Marakalala M. J., Raju R. M., Sharma K., Zhang Y. J., Eugenin E. A., Prideaux B., Daudelin I. B., Chen P. Y., Booty M. G., Kim J. H., Eum S. Y., Via L. E., Behar S. M., Barry CE 3rd, Mann M., Dartois V., Rubin E. J. Inflammatory signaling in human tuberculosis granulomas is spatially organized // Nat Med. – 2016; Vol. 22, № 5. – Р. 531–8. https://doi.org/10.1038/nm.4073Marzo E., Vilaplana C., Tapia G., Diaz J., Garcia V., Cardona P. J. Damaging role of neutrophilic infiltration in a mouse model of progressive tuberculosis // Tuberculosis (Edinb). – 2014, Vol. 94, № 1. – Р. 55–64. https://doi.org/10.1016/ j.tube.2013.09.004Marzo E., Vilaplana C., Tapia G., Diaz J., Garcia V., Cardona P. J. Damaging role of neutrophilic infiltration in a mouse model of progressive tuberculosis // Tuberculosis (Edinb). – 2014, Vol. 94, № 1. – Р. 55–64. https://doi.org/10.1016/ j.tube.2013.09.004Moreira-Teixeira L., Stimpson P. J., Stavropoulos E., Hadebe S., Chakravarty P., Ioannou M., Aramburu I. V., Herbert E., Priestnall S. L., Suarez-Bonnet A., Sousa J., Fonseca K. L., Wang Q., Vashakidze S., Rodríguez-Martínez P., Vilaplana C., Saraiva M., Papayannopoulos V., O`Garra A. Type I IFN exacerbates disease in tuberculosis-susceptible mice by inducing neutrophil-mediated lung inflammation and NETosis // Nat. Commun. – 2020. – Vol. 11, № 1. – Р. 5566. https://doi.org/10.1038/s41467-020-19412-6Moreira-Teixeira L., Stimpson P. J., Stavropoulos E., Hadebe S., Chakravarty P., Ioannou M., Aramburu I. V., Herbert E., Priestnall S. L., Suarez-Bonnet A., Sousa J., Fonseca K. L., Wang Q., Vashakidze S., Rodríguez-Martínez P., Vilaplana C., Saraiva M., Papayannopoulos V., O`Garra A. Type I IFN exacerbates disease in tuberculosis-susceptible mice by inducing neutrophil-mediated lung inflammation and NETosis // Nat. Commun. – 2020. – Vol. 11, № 1. – Р. 5566. https://doi.org/10.1038/s41467-020-19412-6Nathan C. Neutrophils and immunity: challenges and opportunities // Nat. Rev. Immunol. – 2006. – № 6. – P. 173–82. https://doi.org/10.1038/nri1785Nathan C. Neutrophils and immunity: challenges and opportunities // Nat. Rev. Immunol. – 2006. – № 6. – P. 173–82. https://doi.org/10.1038/nri1785Segal A. W. How neutrophils kill microbes // Annu Rev Immunol. – 2005. – № 23. – Р. 197–223. https://doi.org/10.1146/annurev.immunol.23.021704.115653Segal A. W. How neutrophils kill microbes // Annu Rev Immunol. – 2005. – № 23. – Р. 197–223. https://doi.org/10.1146/annurev.immunol.23.021704.115653Yang H., Biermann M. H., Brauner J. M., Liu Y., Zhao Y., Herrmann M. New insights into neutrophil extracellular traps: mechanisms of formation and role in inflammation // Front. Immunol. – 2016. – № 7. – Р. 302. https://doi.org/10.3389/fimmu.2016.00302Yang H., Biermann M. H., Brauner J. M., Liu Y., Zhao Y., Herrmann M. New insights into neutrophil extracellular traps: mechanisms of formation and role in inflammation // Front. Immunol. – 2016. – № 7. – Р. 302. https://doi.org/10.3389/fimmu.2016.00302

The authors declare that there are no conflicts of interest present.