tibljТуберкулез и болезни легкихTuberculosis and Lung Diseases2075-12302542-1506Медицинские знания и технологии10.58838/2075-1230-2024-102-2-36-42tiblj-1802Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESВыявление M. tuberculosis с использованием картриджной технологии у больных с отрицательным результатом микроскопии мокроты в региональной лабораторииDetection of M. tuberculosis Using Cartridge-Based Technology in Patients with Negative Sputum Microscopy Results in a Regional LaboratoryЕлисеевП. И.EliseevP. I.

Елисеев Платон Иванович, доцент кафедры фтизиопульмонологии

163069, г. Архангельск, пр-т Троицкий, д. 51

Тел.: + 7 (8182) 21-11-63

Platon I. Eliseev, Associate Professor of Phthisiopulmonology Department

51 Troitsky Ave., Arkhangelsk, 163069

Phone: + 7 (8182) 21-11-63

pediatrics@yandex.ruНикишоваЕ. И.NikishovaE. I.

Никишова Елена Ильинична, профессор кафедры фтизиопульмонологии

163069, г. Архангельск, пр-т Троицкий, д. 51

Тел.: + 7 (8182) 21-11-63

Elena I. Nikishova, Professor of Phthisiopulmonology Department

51 Troitsky Ave., Arkhangelsk, 163069

Phone: + 7 (8182) 21-11-63

e.i.nikishova@mail.ruКрупскаяА. Ю.KrupskayaA. Yu.

Крупская Анастасия Юрьевна, ассистент кафедры фтизиопульмонологии

163069, г. Архангельск, пр-т Троицкий, д. 51

Тел.: + 7 (8182) 21-11-63

Anastasia Yu. Krupskaya, Assistant of Phthisiopulmonology Department

51 Troitsky Ave., Arkhangelsk, 163069

Phone: + 7 (8182) 21-11-63

anastasiich@mail.ruШтраухВ. И.ShtraukhV. I.

Штраух Валерия Игоревна, ординатор по специальности клиническая лабораторная диагностика кафедры клинической биохимии, микробиологии и лабораторной диагностики

163069, г. Архангельск, пр-т Троицкий, д. 51

Тел.: + 7 (8182) 21-11-63

Valeria I. Shtraukh, Resident Physician of Clinical Diagnostic Laboratory, Department of Clinical Biochemistry, Microbiology and Laboratory Diagnostics

51 Troitsky Ave., Arkhangelsk, 163069

Phone: + 7 (8182) 21-11-63

valeriashtraukh@mail.ruХимоваЕ. С.KhimovaE. S.

Химова Елена Сергеевна, ассистент кафедры фтизиопульмонологии

163069, г. Архангельск, пр-т Троицкий, д. 51

Тел.: + 7 (8182) 21-11-63

Elena S. Khimova, Assistant of Phthisiopulmonology Department

51 Troitsky Ave., Arkhangelsk, 163069

Phone: + 7 (8182) 21-11-63

lenka.ro4eva.2013@yandex.ruМарьяндышевА. О.MaryandyshevA. O.

Марьяндышев Андрей Олегович, член-корреспондент РАМН, профессор, заведующий кафедрой фтизиопульмонологии

163069, г. Архангельск, пр-т Троицкий, д. 51

Тел.: + 7 (8182) 21-11-63

Andrey O. Maryandyshev, Correspondent Member of RAS, Professor, Head of Phthisiopulmonology Department

51 Troitsky Ave., Arkhangelsk, 163069

Phone: + 7 (8182) 21-11-63

maryandyshev@mail.ruФГБОУ ВО «Северный государственный медицинский университет» МЗ РФРоссияNorthern State Medical University, Russian Ministry of HealthRussian Federation20240105202410223642Copyright © Елисеев П.И., Никишова Е.И., Крупская А.Ю., Штраух В.И., Химова Е.С., Марьяндышев А.О., 20242024Елисеев П.И., Никишова Е.И., Крупская А.Ю., Штраух В.И., Химова Е.С., Марьяндышев А.О.Eliseev P.I., Nikishova E.I., Krupskaya A.Y., Shtraukh V.I., Khimova E.S., Maryandyshev A.O.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.tibl-journal.com/jour/article/view/1802Цель исследования

Цель исследования: оценить результаты выявления M. tuberculosis и определения лекарственной чувствительности к рифампицину молекулярно-генетическими методами у больных туберкулезом с отрицательным результатом микроскопии мазка мокроты.

Материалы и методы

Материалы и методы. В исследование были включены больные ТБ легких, зарегистрированные в Архангельской области с 2016 по 2020 гг., с категориями случая «новый случай» и «рецидив» с отрицательным результатом микроскопии мазка мокроты до начала лечения и наличием результатов молекулярно-генетического метода (МГМ) (Xpert MTB/RIF MTB/ RIF) и BACTEC MGIT 960.

Результаты

Результаты. У 479 человек (40%) был зарегистрирован ТБ легких с отрицательным результатом микроскопии мазка мокроты. МГМ был выполнен у 327 (68%) человек. Положительный результат МГМ наблюдался у 120 (37%) человек, положительный результат метода BACTEC MGIT 960 – у 165 (50%) человек. Совпадение результатов отмечалось в 70% случаев. У 136 (41%) человек оба теста не выявили МБТ, у 95 (29%) оба теста показали положительный результат. Расхождения результатов двух тестов отмечались в 30% случаев. В 71 (22%) случае отмечался рост культуры в системе BACTEC MGIT 960 при отрицательном МГМ. В 8% случаев была обнаружена ДНК МБТ, однако отсутствовал рост культуры на питательной среде. Было обнаружено 43/120 (36%) случая устойчивости МБТ к рифампицину. Медианное время от забора мокроты до начала лечения МЛУ ТБ при использовании результатов МГМ из мокроты составило 18 (IQR 10–29) дней. МГМ позволяют в короткие сроки выявлять большинство больных ТБ при отрицательном результате мазка мокроты, а также сокращают время определения лекарственной чувствительности МБТ, что позволяет использовать их в качестве первого теста при обследовании на ТБ легких.  

The objective

The objective: to evaluate results of M. tuberculosis detection and testing drug susceptibility to rifampicin using molecular genetic methods in tuberculosis patients with a negative sputum smear microscopy result.

Subjects and Methods

Subjects and Methods. Pulmonary tuberculosis patients registered in Arkhangelsk Region from 2016 to 2020 were enrolled in the study; those patients were notified as new cases and relapses with a negative sputum smear microscopy result before treatment and had results of molecular genetic testing (MGT) (Xpert MTB/RIF MTB/RIF) and BACTEC MGIT 960 available.

Results

Results. 479 people (40%) were registered as pulmonary tuberculosis cases with a negative sputum smear microscopy result. MGT was performed in 327 (68%) patients. A positive result of MGT was received in 120 (37%) patients, a positive result of BACTEC MGIT 960 was received in 165 (50%) people. Concordance of results was observed in 70% of cases. In 136 (41%) people, both tests did not detect Mycobacterium tuberculosis, in 95 (29%) both tests showed a positive result. Discrepancies between the results of two tests were observed in 30% of cases. In 71 (22%) cases, culture growth was observed in BACTEC MGIT 960 with negative results of MGT. In 8% of cases, DNA of Mycobacterium tuberculosis was detected, but there was no culture growth on the nutrient medium. 43/120 (36%) cases of resistance to rifampicin were detected. The median time from sputum collection to initiation of MDR-TB treatment based on sputum MGT results made 18 (IQR 10–29) days. Molecular genetic testing makes it possible to promptly detect the majority of TB patients with a negative sputum smear result, and reduce the time for drug susceptibility testing, which allows this testing to be used as the first test when examining for pulmonary TB.  

туберкулезмикроскопия мокротымолекулярно-генетические методыtuberculosissputum microscopymolecular genetic testingReferencesАндреевская С. Н., Смирнова Т. Г., Ларионова Е. Е., и др. Сравнение картриджной технологии XPERT MTB/RIF с микробиологическими методами выявления микобактерий туберкулеза и определения лекарственной чувствительности //Туберкулез и социально-значимые заболевания. – 2013, № 2. – С. 25–29.Andreevskaya S.N., Smirnova T.G., Larionova E.E. et al. Comparison of XPERT MTB/RIF cartridge technology with microbiological methods for the detection of Mycobacterium tuberculosis and drug susceptibility testing. Tuberkulez i Sotsialno-Znachimye Zabolevaniya, 2013, no. 2, pp. 25-29. (In Russ.)Бородулина Е. А., Шубина А. Т., Герасимов А. Н., и др. Технологии GX для быстрой диагностики туберкулеза в учреждениях общей лечебной сети //Вестник современной клинической медицины. – 2022. – Т. 15, №. 1. – С. 7–16.Borodulina E.A., Shubina A.T., Gerasimov A.N. et al. GX technologies for rapid diagnosis of tuberculosis in general healthcare network. Vestnik Sovremennoy Klinicheskoy Meditsiny, 2022, vol. 15, no. 1, pp. 7-16. (In Russ.)Васильева И. А., Баласанянц Г. С., Борисов С. Е., и др. Туберкулез у взрослых // Федеральные клинические рекомендации М. – 2022. Клинические рекомендации «Туберкулез у взрослых» URL: https://cr.minzdrav.gov.ru/recomend/16_2 [Дата обращения: 23 декабря 2023 г.]Vasilyeva I.A., Balasanyants G.S., Borisov S.E. et al. Tuberkulez u vzroslykh. Federal klinicheskie rekomendatsii. [Tuberculosis in adults. Federal guidelines]. Moscow, 2022. Available: https://cr.minzdrav.gov.ru/recomend/16_2 Accessed December 23, 2023.Гусейналиева Н. В. Совершенствование выявления туберкулеза в учреждениях первичного медицинского звена и его влияние на показатель заболеваемости // Туберкулез и болезни легких. – 2020. – Т. 98, №. 10. – С. 41–46.Guseynalieva N.V. Improved detection of tuberculosis in primary health care and its impact on the incidence. Tuberculosis and Lung Diseases, 2020, vol. 98, no. 10, pp. 41-46. (In Russ.)Елисеев П. И., Детьен А., Дэйкомб Р., и др. Влияние внедрения молекулярно-генетических методов на сроки начала химиотерапии больных туберкулезом с МЛУ МБТ в Архангельской области // Туберкулез и болезни легких. – 2018. – Т. 95, №. 12. – С. 10–17.Eliseev P.I., Detjen A., Dacombe R. et al. Impact of molecular genetic methods on the initiation of chemotherapy in multiple drug resistant tuberculosis patients in Arkhangelsk Region. Tuberculosis and Lung Diseases, 2018, vol. 95, no. 12, pp. 10-17. (In Russ.)Елисеев П. И., Детьен А., Дэйкомб Р., и др. Применение молекулярно-генетических методов диагностики с целью улучшения результатов лечения МЛУ-ТБ в Архангельской области // Туберкулез и болезни легких. – 2021. – Т. 99, №. 8. – С. 21–26.Eliseev P.I., Detjen A., Dacombe R. et al. The use of molecular genetic diagnostic tests to improve MDR TB treatment outcomes in Arkhangelsk Region. Tuberculosis and Lung Diseases, 2021, vol. 99, no. 8, pp. 21-26. (In Russ.)Елисеев П. И., Никишова Е. И., Горина Г. П., и др. Результаты применения методов Genotype MTBDRPLUS и Bactec MGIT для определения лекарственной чувствительности возбудителя туберкулеза // Туберкулез и болезни легких. – 2012. – Т. 89, №. 6. – С. 31–34.Eliseev P.I., Nikishova E.I., Gorina G.P. et al. Results of Genotype MTBDRPLUS and Bactec MGIT to test drug susceptibility of tuberculous mycobacteria. Tuberculosis and Lung Diseases, 2012, vol. 89, no. 6, pp. 31-34. (In Russ.)Лаптева Е. А., Коваленко И. В., Буракевич О. И. и др. Диагностическая значимость молекулярно-генетического метода Xpert MTB/RIF MTB/RIF для диагностики туберкулеза в сравнении с традиционными методами // Журнал Гродненского государственного медицинского университета. – 2023. – Т. 21, №. 2. – С. 118–123.Lapteva E.A., Kovalenko I.V., Burakevich O.I. et al. Diagnostic value of genexpert MTB/RIF assay for tuberculosis diagnosis compared to traditional methods. Vestnik Grodnenskogo Gosudarstvennogo Meditsinskogo Universiteta, 2023, vol. 21, no. 2, pp. 118-123. (In Russ.)Самойлова А. Г., Буракова М. В., Васильева И. А., и др. Влияние экспресс-детекции резистентности M. tuberculosis к рифампицину на эффективность химиотерапии у больных туберкулезом с множественной лекарственной устойчивостью возбудителя // Туберкулез и болезни легких. – 2016. – Т. 94, №. 9. – С. 18–23.Samoylova A.G., Burakova M.V., Vasilyeva I.A. et al. The impact of express rifampicin susceptibility testing on chemotherapy efficiency in those suffering from multiple drug resistant tuberculosis. Tuberculosis and Lung Diseases, 2016, vol. 94, no. 9, pp. 18-23. (In Russ.)Севастьянова Э. В., Черноусова Л. Н. Современные алгоритмы микробиологической диагностики туберкулеза // Туберкулез и болезни легких. – 2018. – Т. 96, №. 7. – С. 11–17.Sevastyanova E.V., Chernousova L.N. Modern algorithms of microbiological diagnostics of tuberculosis. Tuberculosis and Lung Diseases, 2018, vol. 96, no. 7, pp. 11-17. (In Russ.)Черноусова Л. Н., Севастьянова Э. В., Ларионова Е. Е., и др. Федеральные клинические рекомендации по организации и проведению микробиологической и молекулярно-генетической диагностики туберкулеза. – 2015. URL:https://tub-spb.ru/wp-content/uploads/2020/10/rec8.pdf [Дата обращения: 11 ноября 2023 г.]Chernousova L.N., Sevastyanova E.V., Larionova E.E. et al. Federalnye klinicheskie rekomendatsii po organizatsii i provedeniyu mikrobiologicheskoy i molekulyarno-geneticheskoy diagnostiki tuberkuleza. [Federal clinical recommendations in organization and implementation of microbiological and molecular-genetic diagnostics of tuberculosis]. 2015. Available: https://tub-spb.ru/wp-content/uploads/2020/10/rec8.pdf Accessed November 11, 2023.Эргешов А. Э., Черноусова Л. Н., Андреевская С. Н. Новые технологии диагностики лекарственно-устойчивого туберкулеза // Вестник Российской академии медицинских наук. – 2019. – Т. 74, №. 6. – С. 413–422.Ergeshov A.E., Chernousova L.N., Andreevskaya S.N. New technologies for diagnosing drug-resistant tuberculosis. Vestnik Rossiiskoy Akademii Meditsinskikh Nauk, 2019, vol. 74, no. 6, pp. 413-422. (In Russ.)Acuña-Villaorduña C., Orikiriza P., Nyehangane D., et al. Effect of previous treatment and sputum quality on diagnostic accuracy of Xpert® MTB/RIF // The International Journal of Tuberculosis and Lung Disease. – 2017. – Vol. 21, №. 4. – Р. 389–397.Acuña-Villaorduña C., Orikiriza P., Nyehangane D. et al. Effect of previous treatment and sputum quality on diagnostic accuracy of Xpert® MTB/RIF. The International Journal Tuberculosis and Lung Diseases, 2017, vol. 21, no. 4, pp. 389-397.Albert H., Nathavitharana R. R., Isaacs С., et al. Development, roll-out and impact of Xpert MTB/RIF for tuberculosis: what lessons have we learnt and how can we do better? // European Respiratory Journal. – 2016. – Vol. 48, №. 2. – Р. 516–525.Albert H., Nathavitharana R.R., Isaacs С. et al. Development, roll-out and impact of Xpert MTB/RIF for tuberculosis: what lessons have we learnt and how can we do better? European Respiratory Journal, 2016, vol. 48, no. 2, pp. 516-525.Blakemore R., Story E., Helb D., et al. Evaluation of the analytical performance of the Xpert MTB/RIF assay // Journal of clinical microbiology. – 2010. – Vol. 48, №. 7. – Р. 2495–2501.Blakemore R., Story E., Helb D. et al. Evaluation of the analytical performance of the Xpert MTB/RIF assay. Journal of Clinical Microbiology, 2010, vol. 48, no. 7, pp. 2495-2501.Floyd S., Klinkenberg E., de Haas P., et al. Optimising Xpert-Ultra and culture testing to reliably measure tuberculosis prevalence in the community: findings from surveys in Zambia and South Africa // BMJ open. – 2022. – Vol. 12, №. 6. – Р. e058195.Floyd S., Klinkenberg E., de Haas P. et al. Optimising Xpert-Ultra and culture testing to reliably measure tuberculosis prevalence in the community: findings from surveys in Zambia and South Africa. BMJ Open, 2022, vol. 12, no. 6, pp. e058195.Grimes D. A., Schulz K. F. Refining clinical diagnosis with likelihood ratios // The Lancet. – 2005. – Vol. 365, №. 9469. – Р. 1500–1505.Grimes D.A., Schulz K.F. Refining clinical diagnosis with likelihood ratios. The Lancet, 2005, vol. 365, no. 9469, pp. 1500-1505.Reechaipichitkul W., Phetsuriyawong A., Chaimanee P., Ananta P. Diagnostic test of sputum Xpert MTB/RIF MTB/RIF for smear negative pulmonary tuberculosis // Southeast Asian J Trop Med Public Health. – 2016. – Vol. 47, №. 3. – Р. 457–466.Reechaipichitkul W., Phetsuriyawong A., Chaimanee P., Ananta P. Diagnostic test of sputum Xpert MTB/RIF MTB/RIF for smear negative pulmonary tuberculosis. Southeast Asian J. Trop. Med. Public Health, 2016, vol. 47, no. 3, pp. 457-466.Salman H., Rusch-Gerdes S. MGIT Procedure Manual For BACTEC™ MGIT 960™ TB System; 2006.Salman H., Rusch-Gerdes S. MGIT Procedure Manual For BACTEC™ MGIT 960™ TB System. 2006.Shi J., Dong W., Ma Y., et al. Xpert MTB/RIF MTB/RIF outperforms mycobacterial culture in detecting mycobacterium tuberculosis from salivary sputum // BioMed research international. – 2018. – № 2018. – Р.1514381.Shi J., Dong W., Ma Y. et al. Xpert MTB/RIF MTB/RIF outperforms mycobacterial culture in detecting mycobacterium tuberculosis from salivary sputum. BioMed Research International, 2018, no. 2018, pp. 1514381.Steingart K. R., Schiller I., Horne D. J., et al. Xpert® MTB/RIF assay for pulmonary tuberculosis and rifampicin resistance in adults // Cochrane database of systematic reviews. – 2014. – №. 1. – Р. CD009593.Steingart K.R., Schiller I., Horne D.J. et al. Xpert® MTB/RIF assay for pulmonary tuberculosis and rifampicin resistance in adults. Cochrane Database of Systematic Reviews, 2014, no. 1, pp. CD009593.World Health Organization/ Global TB report. Geneva: World Health Organization; 2021 Available at: https://apps.who.int/iris/handle/10665/346387 [Accessed 10 May 2022].World Health Organization. Global TB report. Geneva, World Health Organization, 2021. Available: https://apps.who.int/iris/handle/10665/346387 Accessed 10 May 2022World Health Organization et al. WHO standard: universal access to rapid tuberculosis diagnostics. – 2023.World Health Organization et al. WHO standard: universal access to rapid tuberculosis diagnostics. 2023.World Health Organization. Updated: Xpert MTB/RIF implementation manual technical and operational “how-to”: practical considerations. Geneva, World Health Organization. – 2014.World Health Organization. Updated: Xpert MTB/RIF implementation manual technical and operational “how-to”: practical considerations. Geneva, World Health Organization, 2014.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.