<?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?>
<!DOCTYPE article PUBLIC "-//NLM//DTD JATS (Z39.96) Journal Publishing DTD v1.3 20210610//EN" "JATS-journalpublishing1-3.dtd">
<article article-type="research-article" dtd-version="1.3" xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink" xmlns:xsi="http://www.w3.org/2001/XMLSchema-instance" xml:lang="ru"><front><journal-meta><journal-id journal-id-type="publisher-id">tiblj</journal-id><journal-title-group><journal-title xml:lang="ru">Туберкулез и болезни легких</journal-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>Tuberculosis and Lung Diseases</trans-title></trans-title-group></journal-title-group><issn pub-type="ppub">2075-1230</issn><issn pub-type="epub">2542-1506</issn><publisher><publisher-name>Медицинские знания и технологии</publisher-name></publisher></journal-meta><article-meta><article-id custom-type="elpub" pub-id-type="custom">tiblj-320</article-id><article-categories><subj-group subj-group-type="heading"><subject>Research Article</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="ru"><subject>ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="en"><subject>ORIGINAL ARTICLES</subject></subj-group></article-categories><title-group><article-title>Разработка технологии пцр в реальном времени для экспресс-определения лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза к противотуберкулезным препаратам резервного ряда: фторхинолонам, амикацину и капреомицину</article-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>Development of real-time pcr technology for the rapid detection of mycobacterium tuberculosis resistance to reserve antituberculosis drugs: fluoroquinolones, amikacin, and capreomycin</trans-title></trans-title-group></title-group><contrib-group><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Аляпкина</surname><given-names>Ю. С.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Alyapkina</surname><given-names>Yu. S.</given-names></name></name-alternatives><email xlink:type="simple">noemail@neicon.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Алексеев</surname><given-names>Я. И.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Alekseev</surname><given-names>Ya. I.</given-names></name></name-alternatives><email xlink:type="simple">noemail@neicon.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-2"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Варламов</surname><given-names>Д. А.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Varlamov</surname><given-names>D. A.</given-names></name></name-alternatives><email xlink:type="simple">noemail@neicon.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-2"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Домотенко</surname><given-names>Л. В.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Domotenko</surname><given-names>L. V.</given-names></name></name-alternatives><email xlink:type="simple">noemail@neicon.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-3"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Шипина</surname><given-names>Л. К.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Shipina</surname><given-names>L. K.</given-names></name></name-alternatives><email xlink:type="simple">noemail@neicon.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-4"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Владимирский</surname><given-names>М. А.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Vladimirsky</surname><given-names>M. A.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>127994, г. Москва, ул. Достоевского, д. 4</p></bio><email xlink:type="simple">noemail@neicon.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-4"/></contrib></contrib-group><aff xml:lang="ru" id="aff-1"><institution>НПФ «Синтол»; НИИ фтизиопульмонологии ГБОУ ВПО «Первый МГМУ им. И. М. Сеченова»</institution><country>Russian Federation</country></aff><aff xml:lang="ru" id="aff-2"><institution>НПФ «Синтол»</institution><country>Russian Federation</country></aff><aff xml:lang="ru" id="aff-3"><institution>НИИ прикладной микробиологии Роспотребнадзора РФ, г. Москва</institution><country>Russian Federation</country></aff><aff xml:lang="ru" id="aff-4"><institution>НИИ фтизиопульмонологии ГБОУ ВПО «Первый МГМУ им. И. М. Сеченова»</institution><country>Russian Federation</country></aff><pub-date pub-type="collection"><year>2014</year></pub-date><pub-date pub-type="epub"><day>01</day><month>12</month><year>2014</year></pub-date><volume>0</volume><issue>12</issue><fpage>69</fpage><lpage>75</lpage><permissions><copyright-statement>Copyright &amp;#x00A9; Аляпкина Ю.С., Алексеев Я.И., Варламов Д.А., Домотенко Л.В., Шипина Л.К., Владимирский М.А., 2014</copyright-statement><copyright-year>2014</copyright-year><copyright-holder xml:lang="ru">Аляпкина Ю.С., Алексеев Я.И., Варламов Д.А., Домотенко Л.В., Шипина Л.К., Владимирский М.А.</copyright-holder><copyright-holder xml:lang="en">Alyapkina Y.S., Alekseev Y.I., Varlamov D.A., Domotenko L.V., Shipina L.K., Vladimirsky M.A.</copyright-holder><license xml:lang="ru" license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.</license-p></license><license xml:lang="en" license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.</license-p></license></permissions><self-uri xlink:href="https://www.tibl-journal.com/jour/article/view/320">https://www.tibl-journal.com/jour/article/view/320</self-uri><abstract><p>На основе технологии ПЦР в реальном времени с использованием системы оригинальной конструкции аллель-специфичных, меченных флурофорами праймеров, комплементарных к последовательности гасителя флюоресценции, разработаны метод и опытные образцы тест-системы для быстрого определения ДНК мутаций микобактерий туберкулеза (МБТ), ответственных за лекарственную устойчивость к препаратам резервного ряда: группы фторхинолонов, амикацину и капреомицину. При использовании молекулярно-генетической тест-системы «Амплитуб-МЛУ-РВ» с целью исследования лекарственной чувствительности исследованы образцы мокроты 68 больных с деструктивным туберкулезом легких, длительно лечившихся препаратами 1-го и 2-го рядов (53 пациента). В 51 (75%) случае эти пациенты выделяли МБТ с МЛУ. Все полученные образцы ДНК МБТ были также исследованы на обнаружение лекарственной устойчивости к фторхинолонам, амикацину и капреомицину как с использованием разработанного метода и опытного набора реагентов, так и с помощью традиционного культурального исследования. При использовании молекулярно-генетического анализа был установлен 90%-ный уровень чувствительности исследования при 96%-ной специфичности.</p></abstract><trans-abstract xml:lang="en"><p>Based on a real-time PCR technology using an original-design system of allele-specific, fluorophore-labelled primers complementary to the sequence of a fluorescence quencher, the authors developed a method and test system prototypes for the rapid determination of Mycobacterium tuberculosis (MBT) DNA mutations responsible for resistance to reserve anti-TB drugs, such as fluoroquinolones, amikacin, and capreomycin.</p><p>To study drug susceptibility, an Amplitube-MDR-RV molecular genetic test system was used to investigate sputum smears from 68 patients with destructive pulmonary tuberculosis who had been long treated with first- and second-line drugs (53 patients). These patients excreted multidrug-resistant MBT in 51 (75%) cases. All obtained MBT DNA samples were also examined for resistance to fluoroquinolones, amikacin, and capreomycin, by employing both the developed method and prototype reagent kits and by conventional culture methods. Molecular genetic analysis established that the study had a sensitivity of 90% and a specificity of 96%. </p></trans-abstract><kwd-group xml:lang="ru"><kwd>лекарственная устойчивость</kwd><kwd>туберкулез</kwd><kwd>препараты резервного ряда</kwd></kwd-group><kwd-group xml:lang="en"><kwd>drug resistance</kwd><kwd>tuberculosis</kwd><kwd>reserve antituberculosis drugs</kwd></kwd-group></article-meta></front><back><ref-list><title>References</title><ref id="cit1"><label>1</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Владимирский М. А., Аляпкина Ю. С., Алексеев Я. И. и др. Применение метода ПЦР в реальном времени для определения и контроля за распространением лекарственно-устойчивых штаммов микобактерий туберкулеза // Пробл. туб. - 2008. - № 4. - С. 38-44.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Владимирский М. А., Аляпкина Ю. С., Алексеев Я. И. и др. Применение метода ПЦР в реальном времени для определения и контроля за распространением лекарственно-устойчивых штаммов микобактерий туберкулеза // Пробл. туб. - 2008. - № 4. - С. 38-44.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit2"><label>2</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Cheng A. F. B., Yew W. W., Chan E. W. C. et al. 2004. Multiplex PCR amplimer conformation analysis for rapid detection of gyrA mutations in fluoroquinolone-resistant Mycobacterium tuberculosis clinical isolates // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. - Vol. 48, № 2. - P. 596-601.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Cheng A. F. B., Yew W. W., Chan E. W. C. et al. 2004. Multiplex PCR amplimer conformation analysis for rapid detection of gyrA mutations in fluoroquinolone-resistant Mycobacterium tuberculosis clinical isolates // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. - Vol. 48, № 2. - P. 596-601.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit3"><label>3</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Guidelines for clinical and operational management of drug-resistant tuberculosis, Paris, France, 232 p.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Guidelines for clinical and operational management of drug-resistant tuberculosis, Paris, France, 232 p.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit4"><label>4</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Maus C. E., Plikaytis B. B., Shinnick T. M. 2005. Molecular analysis of cross-resistance to capreomycin, kanamycin, amikacin, and viomycin in Mycobacterium tuberculosis // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. - Vol. 49, № 8. - P. 3192-3197.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Maus C. E., Plikaytis B. B., Shinnick T. M. 2005. Molecular analysis of cross-resistance to capreomycin, kanamycin, amikacin, and viomycin in Mycobacterium tuberculosis // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. - Vol. 49, № 8. - P. 3192-3197.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit5"><label>5</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Suzuki Y., Katsukawa C., Tamaru A. et al. 1998. Detection of kanamycin-resistant Mycobacterium tuberculosis by identifying mutations in the 16S rRNA gene // J. Clin. Microbiol. - Vol. 36, № 5. - P. 1220-1225.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Suzuki Y., Katsukawa C., Tamaru A. et al. 1998. Detection of kanamycin-resistant Mycobacterium tuberculosis by identifying mutations in the 16S rRNA gene // J. Clin. Microbiol. - Vol. 36, № 5. - P. 1220-1225.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit6"><label>6</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">van Belkum А., Dunne W. M. Next-generation antimicrobial susceptibility testing // J. Clin. Microbiology. - 2013. - Vol. 51, № 7. - P. 2018-2023.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">van Belkum А., Dunne W. M. Next-generation antimicrobial susceptibility testing // J. Clin. Microbiology. - 2013. - Vol. 51, № 7. - P. 2018-2023.</mixed-citation></citation-alternatives></ref></ref-list><fn-group><fn fn-type="conflict"><p>The authors declare that there are no conflicts of interest present.</p></fn></fn-group></back></article>
