Диагностика образцов Bactec иммуноглобулинами гипериммунных сывороток мышей, полученных против модифицированных антигенов клеточной стенки Mycobacterium tuberculosis


https://doi.org/10.21292/2075-1230-2019-97-10-25-30

Полный текст:


Аннотация

Цель исследования: методом двусайтового иммуноферментного анализа (ИФА) оценить специфичность антигенов дигестивно- и химически модифицированной клеточной стенки (КС) M. tuberculosis.

Материалы и методы. Против модифицированных антигенов КС получены гипериммунные сыворотки мышей, из них выделены иммуноглобулины разных подклассов. С их помощью в ИФА исследовано 152 культуры Bactec с микобактериальным и немикобактериальным ростом от больных с заболеваниями легких.

Результаты. При обработке КС протеиназой К (prK) содержание белка снижается в 10 раз, при гидролизе NaOH – более чем в 30 раз. В иммуноблоттинге отмечается сужение спектра распознаваемых антигенов сыворотками гипериммунных мышей (по сравнению с цельными КС), что свидетельствует о снижении их иммуногенности. Модификация КС M. tuberculosis дезавуирует антиген 54 кДа, на который развивается сильный ответ IgG1-подкласса.

Диагностическая эффективность в ИФА с культурами Bactec возрастает при использовании иммуноглобулинов, полученных против антигенов, обработанных протеиназой К ‒ 79,14% (Pr.A) и 86,68% (Pr.G), при сравнении с иммуноглобулинами против исходного препарата ‒ 70,69% (Pr.A) и 69,11% (Pr.G). Специфичность значительно возрастает при использовании IgG1-антител после иммунизации КС обработанными prK (71,92% против 25,93% в исходном препарате). Таким образом, идентифицированы новые антигены M. tuberculosis, против них созданы новые антительные препараты для диагностики в микробиологических культурах.


Об авторах

И. В. Козлова
ФГБНУ «Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза»
Россия

Козлова Ирина Вячеславовна – младший научный сотрудник отдела иммунологии.

107564, Москва, ул. Яузская аллея, д. 2.



В. Г. Авдиенко
ФГБНУ «Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза»
Россия

Авдиенко Вадим Григорьевич – кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник отдела иммунологии.

107564, Москва, ул. Яузская аллея, д. 2.



С. С. Бабаян
ФГБНУ «Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза»
Россия

Бабаян Сурен Суренович – кандидат биологических наук, старший научный сотрудник отдела иммунологии.

107564, Москва, ул. Яузская аллея, д. 2.



И. Ю. Андриевская
ФГБНУ «Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза»
Россия

Андриевская Ирина Юрьевна – младший научный сотрудник отдела микробиологии.

107564, Москва, ул. Яузская аллея, д. 2.



В. Я. Гергерт
ФГБНУ «Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза»
Россия

Гергерт Владислав Яковлевич – доктор медицинских наук, профессор,руководитель отдела иммунологии.

107564, Москва, ул. Яузская аллея, д. 2.



Список литературы

1. Авдиенко В. Г., Бабаян С. С., Козлова И. В., Бочарова И. В. Оценка специфичности противотуберкулезных моноклональных антител в двусайтовом иммуноферментном анализе // Международный научно-исследовательский журнал. – 2018. – № 2 (67), ч. 2. – С. 21-24.

2. Adigun R., Singh R. Tuberculosis // Treasure Island (FL): StatPearls Publ. – 2019.

3. Beckham K., Ciccarelli L., Bunduc C. M. et al. Structure of the mycobacterial ESX-5 type VII secretion system membrane complex by single-particle analysis // Nat. Microbiol. – 2017. – № 2:17047. DOI: 10.1038/nmicrobiol.2017.47.

4. Birhanu A. G., Yimer S. A., Kalayou S. et al. Ample glycosylation in membrane and cell envelope proteins may explain the phenotypic diversity and virulence in the Mycobacterium tuberculosis complex // Sci. Rep. – 2019. – № 9 (1): 2927. DOI: 10.1038/s41598-019-39654-9.

5. Chiaradia L., Lefebvre C., Parra J., Marcoux J. et al. Dissecting the mycobacterial cell envelope and defining the composition of the native mycomembrane // Sci. Rep. – 2017. – № 7 (1): 12807. DOI: 10.1038/s41598-017-12718-4.

6. Gröschel M. I., Sayes F., Simeone R. et al. ESX secretion systems: mycobacterial evolution to counter host immunity // Nat. Rev. Microbiol. – 2016. – № 14 (11). – P. 677-691. DOI: 10.1038/nrmicro.2016.131.

7. Ortalo-Magné A., Dupont M. A., Lemassu A. Molecular composition of the outermost capsular material of the tubercle bacillus // Microbiol. – 1995. – № 141. – P. 1609-1620.

8. Sharrock A., Ruthe A., Andrews E. S. V. et al. VapC proteins from Mycobacterium tuberculosis share ribonuclease sequence specificity but differ in regulation and toxicity // PLoS ONE. – 2018. – № 13 (8): e0203412. DOI: 10.1371/journal.pone.0203412.

9. Siddiqi S. H., Rusch-Gerdes S. MGIT Procedure Manual for BACTEC MGIT 960 ТВ System. – 2006. – P. 89.

10. Smith R. D. Evaluation of diagnostic tests, and Use diagnostic tests in veterinary clinical epidemiology: a problem-oriented approach // 2-Ed. eds. Batterworth-Heinemann, Boston, USA. – 1995. – P. 31-70.

11. Vincent A. T., Nyongesa S., Morneau I. et al. The Mycobacterial cell envelope: a relict from the past or the result of recent evolution? // Front. Microbiol. – 2018. – № 9: 2341. DOI: 10.3389/fmicb.2018.02341.


Дополнительные файлы

Для цитирования: Козлова И.В., Авдиенко В.Г., Бабаян С.С., Андриевская И.Ю., Гергерт В.Я. Диагностика образцов Bactec иммуноглобулинами гипериммунных сывороток мышей, полученных против модифицированных антигенов клеточной стенки Mycobacterium tuberculosis. Туберкулез и болезни легких. 2019;97(10):25-30. https://doi.org/10.21292/2075-1230-2019-97-10-25-30

For citation: Kozlova I.V., Avdienko V.G., Babayan S.S., Andrievskaya I.Y., Gergert V.Y. Diagnosis of Bactec samples by immunoglobulins of mouse hyperimmune sera obtained against modified antigens of the cell wall of Mycobacterium tuberculosis. Tuberculosis and Lung Diseases. 2019;97(10):25-30. (In Russ.) https://doi.org/10.21292/2075-1230-2019-97-10-25-30

Просмотров: 215

Обратные ссылки

  • Обратные ссылки не определены.


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2075-1230 (Print)
ISSN 2542-1506 (Online)